miRNA荧光定量PCR 服务

 miRNA荧光定量PCR 服务

MicroRNA（miRNA）是一类长度约19-24nt的非编码单链RNA，通过碱基互补配对的方式与靶基因的3’-UTR区部分或完全互补，剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译，从而起到转录后调控靶基因表达的作用。它广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中，调控生物体生长发育和疾病发生等过程中相关基因的表达。MiRNA的异常表达可能会导致生理状态的异常和疾病的产生，在多种癌症中，miRNA的表达水平会发生明显改变，有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外，在许多其他的病变组织和细胞中也检测到了miRNA的异常表达。因此对miRNA的表达的研究具有重要意义。

服务项目说明：

miRNA检测技术原理：

                                      检测原理图

第一步：基于Stem-Loop引物的逆转录反应；第二步：通过特异引物染料法或TaqMan探针实时检测PCR产物。（如上图）

技术特点：

（1） 特异性好 可有效区分成熟miRNA中5p和3p形式；

（2） 经济 可对多个miRNA同管逆转录，节约样本资源与反应成本；

（3） 检测分辨度高 可有效分辨低至10%的表达量差异；

（4） 重复性好 在对已知浓度miRNA进行梯度稀释后，线性关系好R2＞0.99（图2）；

（5） 准确性高 一个或多个参照基因与检测基因在同一管内RT反应，定量检测后校正表达量；

检测范例（has-miR-21检测结果）：  

                                                           基因扩增图             

                     溶解曲线图

                                  表达量计算结果图