DNA CpG 甲基化检测

     DNA CpG 甲基化检测  

DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶 (DNA  methyl-transferase, Dnmt) 催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶 (mC) 的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位点，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域，在哺乳动物中mC约占C总量的2－7％。一般说来，DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。

服务项目：
１．甲基化特异性的PCR（Methylation-specific  PCR，MSP）
　　用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变；随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物，如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段，则说明该位点存在甲基化；反之，说明被检测的位点不存在甲基化。
２．亚硫酸氢盐测序法（Bisulfite sequencing  PCR，BSP）
　　用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，则未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变。随后设计BSP引物进行PCR，在扩增过程中尿嘧啶全部转化为胸腺嘧啶，最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化称为BSP-直接测序方法。将PCR产物克隆至载体后进行测序，可以提高测序成功率，这种方法称为BSP-克隆测序法

客户提供：
　　细胞（≥10⁶  个）、组织（≥300mg）、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等样品材料，基因组DNA（体积≥20μl，浓度≥50 ng/μl）。
提供结果：  

1.物序列、实验报告、包括MSP产物的电泳图片

2.扩增曲线、熔解曲线及实验报告

服务要求：  

请认真填写荧光定量PCR检测技术服务委托单,并联系技术人员将委托单发送至：support@novland.com.cn。

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