尿嘧啶 DNA 糖苷酶（UNG 酶）

                                   尿嘧啶 DNA 糖苷酶（UNG 酶）                              

【产品简介】

    尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG、UDG）来源于大肠杆菌重组克隆表达，分子量为25kDa，可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶。UNG酶对RNA无活性，主要应用于PCR扩增产物的防污染。其作用原理基于：如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中，形成了含dU碱基的PCR扩增产物，该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键，降解该PCR扩增产物。

【储存缓冲液】

   20mM Tris-HCl，150mM NaCl，1mM EDTA，1mM DTT，0.05% Tween20，50%glycerol，pH8.0. DNase活性检测

【活性定义】

   37℃条件下，1小时降解1µg含dU碱基的单链DNA的酶量为1单位。

【质量控制】

1、SDS-PAGE电泳纯度大于98%；

2、降解活性、批间差异、稳定性；

3、1U UNG在37℃处理3分钟后，10³拷贝以下含U模版应完全降解，不能产生扩增产物；

4、无外源核酸酶活性，无外源内切、外切核酸酶污染。

【反应条件】

   先于37℃-50℃范围内消化5-10分钟，然后95℃ 3-5分钟灭活，(同时这一步也达到预变性和热启动的效果)，随后进行PCR扩增。 UNG酶的反应可以在37℃-50℃， 5-10分钟的范围内变化，可以根据实验的需要进行调整。

【使用注意】

1、避免多次冻融，切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。

2、UNG酶可以在PCR反应前清除不慎污染的含dUTP的PCR产物，从而避免由于污染导致的假阳性结果。

3、由于不同待扩增基因对dUTP的利用效率和对UNG酶的敏感度不同，因此，如果采用UNG体系导致检测灵敏度下降，应对反应体系进行调整优化。

4、扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR反应完成后切勿打开反应管。以最大限度的减少PCR产物对样品的污染。

【保存条件】

长期储存可保存于-70℃，但必须严格避免-70℃保存时的反复冻融。

注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。